酵母菌發(fā)酵是較經(jīng)濟(jì)的真核表達(dá)系統(tǒng)，可大規(guī)模生產(chǎn)需要翻譯后修飾的分泌蛋白和細(xì)胞內(nèi)蛋白，包括人源化抗體。發(fā)酵和表達(dá)服務(wù)，自有的酵母發(fā)酵技術(shù)，集高產(chǎn)量、有效和類(lèi)似哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)的特點(diǎn)為一體，蛋白表達(dá)持久、穩(wěn)定。
服務(wù)特點(diǎn)
- g級(jí)蛋白生產(chǎn)： 適用于工業(yè)酶的定制生產(chǎn)。
- 高產(chǎn)量： 與大腸桿菌相比，蛋白產(chǎn)量增加2倍；酵母發(fā)酵產(chǎn)量5~10g/L。
- 穩(wěn)定生產(chǎn)工藝： 目的蛋白表達(dá)元件被整合到基因組中，形成穩(wěn)定的蛋白表達(dá)過(guò)程。
酵母表達(dá)純化服務(wù)詳情
客戶(hù)提供 | 步驟 | 詳情 | 周期 | 交付標(biāo)準(zhǔn) |
目的序列（DNA或蛋白）/DNA模板/表達(dá)載體 | 基因合成和亞克?。蛇x） | ·亞克隆至適當(dāng)?shù)谋磉_(dá)載體中 ·質(zhì)粒大抽·構(gòu)建線性化載體 | 2周 | 載體構(gòu)建報(bào)告 |
表達(dá)和評(píng)估 | ·將線性載體轉(zhuǎn)化至適合的宿主 ·通過(guò)PCR方法確定陽(yáng)性轉(zhuǎn)化株 ·表達(dá)確認(rèn) ·SDS-PAGE和/或Western blot | 2周 | 表達(dá)報(bào)告 | |
1L表達(dá)和純化 | ·1L酵母培養(yǎng)表達(dá) ·一步純化或多步純化達(dá)到≥90%純度 ·*QC檢測(cè)，包括SDS-PAGE、Western blot和LC-MS/MS覆蓋率檢測(cè) | 2周 | ·純化的蛋白 ·QC報(bào)告 | |
放大生產(chǎn)和純化（可選） | ·至多2,000L的大規(guī)模生產(chǎn)（使用發(fā)酵罐以及TFF大規(guī)模過(guò)濾系統(tǒng)） ·交付的蛋白純度高達(dá)90%及以上 ·標(biāo)簽去除 | 2-3 周 | ·酵母胞漿/已純化的蛋白 ·QC報(bào)告 |
* QC：SDS-PAGE用于檢測(cè)純度；BCA或Bradford用于檢測(cè)蛋白濃度；使用Anti-His和Anti-GST進(jìn)行Western blot檢測(cè)蛋白純度（可選）；LC-MS/MS覆蓋率檢測(cè)用于確定目的蛋白（可選）。
如果不需要下游蛋白純化的酵母發(fā)酵服務(wù)，請(qǐng)從下表選擇靈活規(guī)模的酵母發(fā)酵服務(wù)。
酵母發(fā)酵服務(wù)詳情
客戶(hù)提供 | 發(fā)酵體積 | 周期 | 交付標(biāo)準(zhǔn) | 類(lèi)型 |
·目的序列 ·DNA/表達(dá)載體 ·甘油菌 ·微生物生長(zhǎng)平板 | 5L | 1~2周 | ·酵母胞漿 ·批次記錄 ·QC數(shù)據(jù)表 | 可選： ·正常發(fā)酵 ·高密度發(fā)酵 |
10L | ||||
20L | ||||
50L | ||||
100L | 2~3周 | |||
200L | ||||
300L | ||||
500L | 3~4周 |
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