在蛋白質(zhì)電泳實(shí)驗(yàn)中，考馬斯亮藍(lán)染色法因其操作簡(jiǎn)單、成本低廉而廣受歡迎。然而，傳統(tǒng)染色后的脫色步驟耗時(shí)費(fèi)力，往往需要多次更換脫色液并長(zhǎng)時(shí)間振蕩，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)效率。更令人頭疼的是，脫色過(guò)程中甲醇等有機(jī)溶劑的使用不僅對(duì)實(shí)驗(yàn)人員健康構(gòu)成威脅，還可能因操作不當(dāng)導(dǎo)致蛋白條帶丟失或背景不清。統(tǒng)PAGE凝膠染色液中使用的甲醇和乙酸，對(duì)人體有毒害且具有刺激性氣味。

 

圖：WB實(shí)驗(yàn)過(guò)程中

針對(duì)這一試驗(yàn)痛點(diǎn)。西寶生物經(jīng)過(guò)潛心開(kāi)發(fā)，終于找到突破性解決方案，開(kāi)發(fā)出免脫色考馬斯亮藍(lán)快速染色液。通過(guò)創(chuàng)新配方設(shè)計(jì)，專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于變性或非變性聚丙烯酰胺電泳（Polyacrylamide gelelectrophoresis，PAGE）相關(guān)的凝膠染色使用，染料為考馬斯亮藍(lán)G250。可直接染色PAGE膠，無(wú)需脫色。染色快速、高效。

染色效果驗(yàn)證： 浸泡10min即可檢測(cè)到100ng條帶；30min可檢測(cè)到50ng條帶；經(jīng)優(yōu)化后可以檢測(cè)到20ng條帶。本品不含傳統(tǒng)PAGE凝膠染色液中使用的甲醇和乙酸，對(duì)人體無(wú)毒害、無(wú)刺激性氣味。

1. 進(jìn)行聚丙烯酰胺電泳使蛋白在凝膠中分離；

2. 電泳結(jié)束后，將凝膠從電泳裝置中取出，用去離子水快速漂洗凝膠（若需高靈敏度染色，可清洗3次，每次5min）；

3. 在清洗好的凝膠中加入適量本染色液（以完全浸沒(méi)凝膠為準(zhǔn)），在室溫下染色10~30min，直至目標(biāo)蛋白條能清晰可見(jiàn)，棄染色液；

4. 用適量的去離子水洗去殘留的染色液，停止染色反應(yīng)，隨后可進(jìn)行拍照記錄。

①染色快速、高效、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好，無(wú)需脫色即可實(shí)現(xiàn)低背景染色；

②不含甲醇、乙酸等，對(duì)人體無(wú)毒害、無(wú)刺激性氣味；

③組分明確，不影響樣本后續(xù)質(zhì)譜分析試驗(yàn)；

④線(xiàn)性?xún)?yōu)良，在低蛋白量范圍呈線(xiàn)性劑量響應(yīng)。

圖：通過(guò)測(cè)定不同濃度的BSA快速染色結(jié)果（上圖為seebio品牌、下圖為B*品牌）